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化妆品安全性评价试验方法:致畸试验

2022-07-06 11:50:47
化妆品安全性评价试验方法:致畸试验

  致畸试验目的:致畸试验是鉴定化学物质是否具有致畸性的一种方法。通过致畸试验,一 方面鉴定化学物质有无致畸性,另一方 面确定其胚胎毒作用,为化学物质在化妆品中安全使用提供依据。
 

  定义:胚胎发育过程中,接触了某种有害物质影响器官的分化和发育,导致形态和机能的缺陷,出现胎儿畸形,这种现象称为致畸作用。引起胎儿畸彤的物质称为致畸原。
 

  实验动物的选择:常用的实验动物是小白鼠,大白鼠和兔,大、小白鼠为*动物。选用健康性成熟大鼠90~100天龄,雌性应足初产的。
 

  剂量和分组:至少设4组,其中三组给药组和一组空白对照组。每组至少12只孕鼠。初次进行致畸试验或引入新的动物种株时,需要设阳性对照组。常用阳性对照物有敌枯双、五氯酚钠、维生素A等等。根据受试物的动物半数致死量(LD50)和备积性的大小,确定受试验的给药剂量,应该包括无作用剂量组,有致畸作用剂量组和明显致畸剂量组。
 

试验方法

  “孕鼠”的检出和给药时间

  雌鼠和雄鼠按1:1(或2:1)同笼,每日晨观察阴栓(或阴道涂片),查出阴栓(或精子)的当天定为孕期零天。如果五天内没查出“受精鼠”,应调换雌鼠。检出的“受精鼠”按随机分组,称重和编号。在大鼠孕期6~15天期间,每天灌胃给药。
 

  孕鼠于孕期0日、6日、10日、15日和20日称平,并根据体重调整给药量。保持动物室内环境安静,室温控制在20度个25度为宜,适当地给孕鼠增加营养,如加麦芽或蛋糕等。
 

孕鼠处死和一般检查

  第20天孕大鼠用20%硫责妥钠1~1.5ml腹腔注射麻醉断头处死。剖腹腔检查卵巢内黄体数,取出子宫,称重,检查活胎、早期吸收和迟死胎数目。
 

活胎鼠的检查

  逐个记录活胎鼠体重,性别,体长。外观检查头颅外形、面部、躯干、四肢等有无畸形,包括:露脑、脑膨出、眼部畸形(小眼、无眼、睁眼等鼻孔扩大,单鼻孔、唇裂、脊柱裂、四肢扩尾畸形等等。

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