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化妆品安全性评价试验方法:动物骨髓嗜多染细胞微核试验

2022-07-07 13:13:26

  化妆品安全性评价试验中的鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames)试验、哺乳动物骨髓细胞染色体畸变检测试验、动物骨髓嗜多染细胞微核试验和小鼠精子畸形检测试验介绍。
 

动物骨髓嗜多染细胞微核试验

  研究化学物诱发哺乳动物染色体畸变的方法很多,微核试验以其简便、快速、具

  有一定的敏感性,被广泛用于遗传毒理学研究中。
 

目的

  该试验是一种用体内试验来检查骨髓细胞染色体畸变的方法,特别适用于检出纺锤体的部分损害而出现的染色体丢失或染色单体的无着丝点片段
 

实验动物和剂量分组

  小白鼠是微核试验的常规动物,也可选用大白鼠,一般常用体重为25~30g的小鼠或体重为150~200g的大鼠,雌雄皆可,每个剂量组至少5只动物,另外设溶剂对照组和阳性物组。常用环磷酰胺做为阳性对照物。
 

  根据受试物理化性质(尤其是水溶性脂溶性),确定受试物所用的溶剂,常用水、植物油(玉米油等)或吐温-80等溶济。剂量的选择是很重要的,用药量太低,会漏掉阳性物,用药量太大,可致动物死亡,或因对骨髓毒性作用太强,致使嗜多染红细胞受到抑制,难以获得正确的结果。一般取受试物 LD50的1/2、 1/5、1/10、 1/20等剂量,以求获得微核的剂量一反应关系曲线。
 

给药途径和方式

  给药途径视试验目的而定,常用经口灌胃方式,建议采用30小时给药法,即两次给药间隔24小时,第二次给药后6小时取材。
 

试验方法

  骨髓液的制取

  动物脱颈处死,打开胸腔,沿着胸骨与肋骨交界处剪断,剥掉附着胸骨上的肌肉,擦净血污,横向切断胸骨,暴露止髓腔,然后用小骨血钳挤出胸骨骨髓液。

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